冷凍研磨儀對(duì)樣品RNA研磨提取的整體操作流程
2020-09-18 08:59:55
其實(shí)真正要說(shuō)到對(duì)樣品RNA的提取，我們之前所做的只是研磨樣品，但樣品中的成分提取卻是沒(méi)有分享過(guò)的，今天借此機(jī)會(huì)，小編就來(lái)給你剛剛冷凍研磨儀是怎樣對(duì)樣品的RNA進(jìn)行提取的。
液氮研磨儀人性化設(shè)計(jì)，經(jīng)久耐用，操作簡(jiǎn)單。廣泛應(yīng)用于生物化學(xué)，動(dòng)植物學(xué)，醫(yī)學(xué)，礦物學(xué)，材料學(xué)等行業(yè)領(lǐng)域中。選用電磁沖擊技術(shù)粉碎研磨樣品，將裝有樣品的研磨罐放到液氮預(yù)冷幾分鐘，利用電磁驅(qū)動(dòng)鋼沖擊器在超低溫環(huán)境下來(lái)回沖擊樣品，從而快速?gòu)氐椎难心悠?。與傳統(tǒng)研磨相比，這種獨(dú)特的研磨方式所需時(shí)間更短，樣品研磨更細(xì)。在樣品的研磨過(guò)程在，不僅避免了樣品之間的交叉污染，還能滿足不同客戶的各種研磨需求，是公認(rèn)的“研磨手段”。
冷凍研磨儀對(duì)樣本RNA的提?。?/strong>
1．實(shí)驗(yàn)操作臺(tái)、移液槍、槍頭盒、管架等實(shí)驗(yàn)用品需要使用百分之75的乙醇滅菌，然后再擦拭上述研磨器具。
2.取出儲(chǔ)存在零下80度冰箱中的組織塊，放入預(yù)冷過(guò)的研缽中，破碎組織塊，研磨成粉末狀，再使用勺子將粉末轉(zhuǎn)移到離心管內(nèi)。
3、待液氮揮發(fā)完，加入裂解液，用移液管吹散細(xì)胞，確保細(xì)胞至完全裂解。如有必要，可以使用水平振蕩器將它們均勻混合。在借用離心機(jī)使其離心，沉淀。
4、再加入三氯甲烷，比例為200微升三氯甲烷/毫升三唑，將其倒置混合，并在室溫下放置存放15分鐘左右。
5、在使用離心機(jī)將其離心15分鐘左右，取上清液，注意是吸取上層，不要觸碰中層或下層。在零下20℃的環(huán)境下加入等體積異丙醇進(jìn)行沉淀1小時(shí)。
6、在使用離心機(jī)將其離心10分鐘左右，加入1ml百分之75的酒精漂洗沉淀，再使用離心機(jī)將其離心5分鐘左右。如有需要，可重復(fù)使用酒精漂洗。
7、棄掉上清液，可以選擇再次離心去除殘留的乙醇，在安全柜中沉淀干燥，但不要過(guò)度干燥，只需將乙醇蒸發(fā)完即可。
8、根據(jù)樣品沉淀物的大小，用無(wú)核糖核酸酶的水充分溶解核糖核酸沉淀物。選用溶解沉淀量，測(cè)定RNA的濃度。
9、用電泳檢測(cè)RNA的完整性，110V電泳30分鐘左右，沉積物最終存放在零下80度的低溫冰箱中。
這就是一個(gè)整體的對(duì)樣品RNA提取的一個(gè)操作流程，雖然過(guò)程有些麻煩，但結(jié)果總是令人驚喜，有這樣一個(gè)研磨幫手，真的是研磨快速高效了好多好多。
粵公網(wǎng)安備44011202002807號(hào)